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Expression Et Caractérisation de la Lipoxygenase Recombinante D Olive
ISBN-13: 9786131594083 / Francuski / Miękka / 2018 / 124 str.
Les lipoxygA(c)nases (LOXs, EC 1.13.11.12) sont des dioxygA(c)nases qui catalysent l'oxydation des acides gras polyinsaturA(c)s. Plusieurs isoformes vA(c)gA(c)tales ont A(c)tA(c) caractA(c)risA(c)es mais leur rAle physiologique reste peu connu. Dans le but d'A(c)claircir le rAle de la LOX chez l'olive, un ADNc codant pour une de ses isoformes a A(c)tA(c) clonA(c). Cet ADNc montre de forts pourcentages d'identitA(c) avec d'autres LOXs vA(c)gA(c)tales. L'enzyme recombinante, prA(c)sente une double spA(c)cificitA(c), elle produit des 9- et des 13-hydroperoxydes dans un rapport 2:1. Bien que l'activitA(c) LOX soit dA(c)tectA(c)e A tous les stades de maturation du fruit, la 9/13-LOX est uniquement exprimA(c)e dans les stades noirs. Sans exclure son rAle dans l'A(c)laboration de l'arAme, ces rA(c)sultats suggA]rent que la 9/13-LOX est probablement associA(c)e aux phA(c)nomA]nes de maturation et de sA(c)nescence des fruits. Afin d'augmenter le rendement de la 9/13-LOX d'olive recombinante, l'accessibilitA(c) du substrat A son site actif a A(c)tA(c) facilitA(c)e par mutagenA]se dirigA(c)e. Les mutants, prA(c)sentent un taux de conversion de l'acide linolA(c)ique jusqu'A 4 fois supA(c)rieur A celui de l'enzyme native et ont des paramA]tres cinA(c)tiques similaires A la LOX1 de soja commercialisA(c)e.
Les lipoxygénases (LOXs, EC 1.13.11.12) sont des dioxygénases qui catalysent loxydation des acides gras polyinsaturés. Plusieurs isoformes végétales ont été caractérisées mais leur rôle physiologique reste peu connu. Dans le but déclaircir le rôle de la LOX chez lolive, un ADNc codant pour une de ses isoformes a été cloné. Cet ADNc montre de forts pourcentages didentité avec dautres LOXs végétales. Lenzyme recombinante, présente une double spécificité, elle produit des 9- et des 13-hydroperoxydes dans un rapport 2:1. Bien que lactivité LOX soit détectée à tous les stades de maturation du fruit, la 9/13-LOX est uniquement exprimée dans les stades noirs. Sans exclure son rôle dans lélaboration de larôme, ces résultats suggèrent que la 9/13-LOX est probablement associée aux phénomènes de maturation et de sénescence des fruits. Afin daugmenter le rendement de la 9/13-LOX dolive recombinante, laccessibilité du substrat à son site actif a été facilitée par mutagenèse dirigée. Les mutants, présentent un taux de conversion de lacide linoléique jusquà 4 fois supérieur à celui de lenzyme native et ont des paramètres cinétiques similaires à la LOX1 de soja commercialisée.
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