ISBN-13: 9786131536472 / Francuski / Miękka / 2018 / 200 str.
Les lA(c)sions de l''ADN sont un dA(c)fi pour les systA]mes de rA(c)paration cellulaire. Parmi ceux-ci le systA]me de rA(c)paration par excision de bases (BER) assure la reconnaissance et le retrait de la base lA(c)sA(c)e. Avec la rA(c)sonance plasmonique de surface par imagerie (SPRi), nous disposons d''une technique d''analyse en temps rA(c)el, sans marquage avec laquelle nous avons pu observer des interactions parallA(c)lisA(c)es d''une protA(c)ine enzymatique purifiA(c)e (Fpg, OGG1, EndoIV ou Ape1) vis- A -vis de diffA(c)rentes lA(c)sions sur des oligonuclA(c)otides de synthA]se immobilisA(c)s sur une surface d''or. Les dommages A(c)tudiA(c)s sont une base oxydA(c)e (8-oxoG), une base cyclisA(c)e (cycloadA(c)nine) et des analogues de sites abasiques (THF et C3). Nous avons A(c)galement A(c)tudiA(c) leur action sur des lA(c)sions multiples, associant les bases 8-oxoG et 8-oxoA sur le mAame brin d''ADN. L''originalitA(c) de notre dispositif associe l''analyse directe de l''interaction ADN/protA(c)ine et l''approche indirecte de sa consA(c)quence par une stratA(c)gie d''hybridation et d''amplification du signal. Les rA(c)sultats obtenus permettent d''envisager l''A(c)tude de la rA(c)paration simultanA(c)e par des extraits cellulaires ou tissulaires humains.
Les lésions de lADN sont un défi pour les systèmes de réparation cellulaire. Parmi ceux-ci le système de réparation par excision de bases (BER) assure la reconnaissance et le retrait de la base lésée. Avec la résonance plasmonique de surface par imagerie (SPRi), nous disposons dune technique danalyse en temps réel, sans marquage avec laquelle nous avons pu observer des interactions parallélisées dune protéine enzymatique purifiée (Fpg, OGG1, EndoIV ou Ape1) vis- à-vis de différentes lésions sur des oligonucléotides de synthèse immobilisés sur une surface dor. Les dommages étudiés sont une base oxydée (8-oxoG), une base cyclisée (cycloadénine) et des analogues de sites abasiques (THF et C3). Nous avons également étudié leur action sur des lésions multiples, associant les bases 8-oxoG et 8-oxoA sur le même brin dADN. Loriginalité de notre dispositif associe lanalyse directe de linteraction ADN/protéine et lapproche indirecte de sa conséquence par une stratégie dhybridation et damplification du signal. Les résultats obtenus permettent denvisager létude de la réparation simultanée par des extraits cellulaires ou tissulaires humains.