ISBN-13: 9786131526183 / Francuski / Miękka / 2018 / 252 str.
Ce memoire de these est dedie a l'etude de la reparation des cassures doubles brins de l'ADN par recombinaison homologue. Afin de mieux comprendre les mecanismes de recombinaison, nous avons utilise des techniques de molecule unique nous permettant d'observer in vitro la reparation de l'ADN avec une resolution temporelle et spaciale jusqu'alors jamais atteinte. Nous avons tout d'abord utilise une technique de pinces magnetiques pour etudier les proteines centrales de la recombinaison: RecA chez E.coli et hRad51 chez l'Homme. Nous avons ensuite devolepper de nouvelles techniques de molecules uniques en les appliquant a l'etude de la recombinaison homologue. En particulier, nous presentons un montage original appele "tomopinces" permettant de combiner une pince magnetique a de la microscopie en fluorescence. Nous montrons qu'il est ainsi possible d'etirer une molecule unique d'ADN, de la contraindre en torsion tout en visualisant des molecules. Cette etude nous a permis de mieux comprendre la dynamique des complexes ADN/proteines lors de la reparation des cassures doubles brins par recombinaison homologue."
Ce mémoire de thèse est dédié à létude de la réparation des cassures doubles brins de lADN par recombinaison homologue. Afin de mieux comprendre les mécanismes de recombinaison, nous avons utilisé des techniques de molécule unique nous permettant dobserver in vitro la reparation de lADN avec une résolution temporelle et spaciale jusqualors jamais atteinte. Nous avons tout dabord utilisé une technique de pinces magnétiques pour étudier les protéines centrales de la recombinaison: RecA chez E.coli et hRad51 chez lHomme. Nous avons ensuite devolepper de nouvelles techniques de molecules uniques en les appliquant à létude de la recombinaison homologue. En particulier, nous présentons un montage original appelé "tomopinces" permettant de combiner une pince magnétique à de la microscopie en fluorescence. Nous montrons quil est ainsi possible détirer une molécule unique dADN, de la contraindre en torsion tout en visualisant des molécules. Cette étude nous a permis de mieux comprendre la dynamique des complexes ADN/protéines lors de la réparation des cassures doubles brins par recombinaison homologue.