Neue molekulare Pinzetten und die Hemmung der Enzyme PARP-1/G6PD » książka
Neue molekulare Pinzetten und die Hemmung der Enzyme PARP-1/G6PD
ISBN-13: 9783838135434 / Niemiecki / Miękka / 2013 / 248 str.
Im Rahmen dieser Arbeit wurden Untersuchungen zu der Hemmung des Enzyms Poly-(ADP-Ribose)-Polymerase (PARP-1) durch die Phosphatpinzette um den Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA) erweitert. Es erfolgten weitere Kinetikmessungen mit verschiedenen Konzentrationen an Phosphatpinzette. Weitere Untersuchungen umfassten die Hemmung der Glucose-6-phosphat Dehydrogenase (G6PD) durch die Phosphatpinzette. Neben der Bestimmung der mittleren inhibitorischen Konzentration und der Enzymkinetik wurde die Hemmung auf eine mogliche Denaturierung des Enzyms und die vorliegende Stochiometrie des Komplexes untersucht. Ferner wurden neue molekulare Pinzetten entwickelt, die einen strukturellen Unterschied zu der Phosphatpinzette aufweisen. Es wurde durch die Uberfuhrung in ein anderes Anion die Wirkung des Phosphats auf die Bindungsaffinitat untersucht. Die Entwicklung einer unsymmetrischen Pinzette mit zwei verschiedenen Anionen hat weiteren Aufschluss uber die Effektivitat der Phosphatgruppe geliefert. Untersuchungen an unsymmetrischen Pinzetten sollten zudem eine Ubersicht liefern, in wie weit eine Erkennungseinheit zur Spezifizierung der Hemmung an diese angebracht werden kann.
Im Rahmen dieser Arbeit wurden Untersuchungen zu der Hemmung des Enzyms Poly-(ADP-Ribose)-Polymerase (PARP-1) durch die Phosphatpinzette um den Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA) erweitert. Es erfolgten weitere Kinetikmessungen mit verschiedenen Konzentrationen an Phosphatpinzette. Weitere Untersuchungen umfassten die Hemmung der Glucose-6-phosphat Dehydrogenase (G6PD) durch die Phosphatpinzette. Neben der Bestimmung der mittleren inhibitorischen Konzentration und der Enzymkinetik wurde die Hemmung auf eine mögliche Denaturierung des Enzyms und die vorliegende Stöchiometrie des Komplexes untersucht. Ferner wurden neue molekulare Pinzetten entwickelt, die einen strukturellen Unterschied zu der Phosphatpinzette aufweisen. Es wurde durch die Überführung in ein anderes Anion die Wirkung des Phosphats auf die Bindungsaffinität untersucht. Die Entwicklung einer unsymmetrischen Pinzette mit zwei verschiedenen Anionen hat weiteren Aufschluss über die Effektivität der Phosphatgruppe geliefert. Untersuchungen an unsymmetrischen Pinzetten sollten zudem eine Übersicht liefern, in wie weit eine Erkennungseinheit zur Spezifizierung der Hemmung an diese angebracht werden kann.
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