Einführung in Die HPLC

ISBN-13: 9783642647451 / Niemiecki / Miękka / 2011 / 265 str.

Sandie Lindsay; S. Lamotte; M. Treitz

Opis

Die HPLC (Hochleistungsfl ssigchromatographie) ist eine Routinemethode zur analytischen und pr parativen Trennung von Substanzen geworden. Trotzdem treten im t glichen Gebrauch viele unerwartete Probleme auf. Dieses Buch vermittelt nicht nur didaktisch gut aufbereitet die Theorie der Methode, sondern f hrt den Leser und Lernenden mit regelm igen Fragen direkt nach einer Lerneinheit zum Wiederholen des Stoffes und zum selbst ndigen transferieren des Gelernten auf ein praktisches Beispiel aus dem Alltag. Neben den theoretischen Grundlagen werden instrumentelle Aspekte wie S ulen, Detektoren und mobile und station re Phasen besprochen. Auch anwendungsorientierte Kapitel zur Methodenentwicklung oder zu speziellen Methoden finden sich in diesem Lehrbuch. Es geh rt daher als unentbehrlicher Helfer neben jedes HPLC-Ger t.

Spis treści

1 Einführung.- 1.1 Geschichte und Grundprinzipien.- 1.2 Instrumentelle Grundausstattung.- 1.3 Zusammenfassung.- 2 Retention und Bandenverbreiterung.- 2.1 Retentionsmessung.- 2.2 Effizienz einer Säule.- 2.3 Die Auflösung.- 2.4 Die Bandenverbreiterung.- 2.5 „Extra-Column-Effects“.- 2.6 Zusammenfassung.- 3 Lösemittelförderung und Injektion der Probe.- 3.1 Eluentenvorratsgefäß.- 3.2 Druck, Fluß und Temperatur.- 3.3 Pumpen - Allgemeine Betrachtungen.- 3.3.1 Druckkonstante Pumpen.- 3.3.2 Flußkonstante Pumpen.- 3.4 Gradientenbildung.- 3.5 Probenaufgabe.- 3.6 Zusammenfassung.- 4 Säulen.- 4.1 Maße und Anschlüsse.- 4.2 Kartuschensysteme.- 4.3 Axiale und radiale Kompression.- 4.4 Zusammenfassung.- 5 Detektoren.- 5.1 Einleitung.- 5.2 Nachweisgrenzen.- 5.3 UV-Absorptions-Detektoren.- 5.4 Der Diodenarraydetektor (DAD).- 5.5 Fluoreszenzdetektor.- 5.6 Elektrochemische (EC) Detektoren.- 5.6.1 Einleitung.- 5.6.2 Amperometrische Detektoren.- 5.6.3 Coulometrische Detektoren.- 5.7 Brechungsindex-Detektoren.- 5.8 Derivatisierungsreaktion.- 5.9 Zusammenfassung.- 6 Die mobile Phase.- 6.1 Die Bedeutung der Polarität in der HPLC.- 6.2 Polaritätsmessung.- 6.3 Die Einteilung der Lösemittel nach Snyder.- 6.4 Isoeluotrope mobile Phasen.- 6.5 Optimierung der mobilen Phasen.- 6.5.1 Sequentielle Methoden.- 6.5.2 Prädektive (vorhersagende) Methoden.- 6.5.3 Iterative Methoden.- 6.5.4 Kommerzielle Systeme.- 6.6 Zusammenfassung.- 7 Säulenpackungen und Methoden der HPLC.- 7.1 Pie stationäre Phase.- 7.2 Gebundene Phasen.- 7.3 Andere stationäre Phasen.- 7.4 Trennmethoden in der HPLC.- 7.5 Normalphasen- und Umkehrphasenchromatographie.- 7.5.1 Hydrophobic-Interaction-Chromatography (HIC).- 7.5.2 Zusammenfassung.- 7.6 Die Ionenchromatographie.- 7.6.1 Ionenaustauschchromatographie.- 7.6.2 Trennmethoden in der IC.- 7.6.3 Faktoren, die die Retention beeinflussen.- 7.6.4 Fällung und Komplexierung.- 7.6.5 Detektionsmethoden in der IC.- 7.6.6 Techniken beim Einsatz des Leitfähigkeitsdetektors.- 7.6.7 Ionenunterdrückung und Ionenpaarchromatograpie.- 7.6.8 Zusammenfassung.- 7.7 Adsorptions- und Ausschlußchromatographie.- 7.7.1 Adsorptionschromatographie.- 7.7.2. Ausschlußchromatographie.- 7.7.3. Zusammenfassung.- 8 Methodenentwicklung.- 8.1 Bestimmung von Coffein in entcoffeiniertem Kaffee.- 8.2 Trennung von Steroiden.- 8.2.1 Zusammenfassung.- 8.3 Gradientelution.- 8.3.1 Die Entwicklung einer Gradienttrennung.- 8.3.2 Zusammenfassung.- 8.4 Quantitative Analyse.- 8.4.1 Flächen/Höhen Prozent (oder innere Normierung).- 8.4.2 Die Methode der externen Standards.- 8.4.3 Die Methode des internen Standards.- 8.4.4 Zusammenfassung.- 9 Praktische Aspekte der HPLC.- 9.1 Packen der Säulen.- 9.1.1 Zusammenfassung.- 9.2 Herstellung der mobilen Phasen.- 9.2.1 Zusammenfassung.- 9.3 Praktische Tips zur Behandlung von Säulen und Proben.- 9.3.1 Behandlung von HPLC-Säulen.- 9.3.2 Schutz der Säule während der Betriebszeit.- 9.3.3 Probenvorbereitung und Clean-up (Probenaufreinigung).- 9.3.4. Säulenschalten.- 9.3.5. Zusammenfassung.- 10 Einige weitere Themen.- 10.1 „Microbore“-Säulen und schnelle HPLC.- 10.1.1 „ Microboret“-Säulen.- 10.1.2 Schnelle HPLC-Trennungen.- 10.1.3 Zusammenfassung.- 10.2 Trennung von Enantiomeren.- 10.2.1 Einleitung.- 10.2.2 Trennung von Diastereomeren.- 10.2.3 Chirale stationäre Phasen (CSP).- 10.2.4 Zusammenfassung.- 10.3 Flash-Chromatographie.- 10.4 Präparative HPLC.- 10.4.1 Zusammenfassung.- 10.5 SFC.- 10.6 LC-MS.- a) Moving belt (dt.: sich bewegendes Band).- b) DLI (Direct Liquid Introduction (dt.: direkte Flüssigkeitszufuhr)).- c) Thermospray.- d) Teilchenstrahl-Interfaces.- 10.6.1 Zusammenfassung.- 11 Antworten.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Maßeinheiten.- Tabellen.- Tabelle 1: Häufig benutzte Symbole und Abkürzungen in der analytischen Chemie.- Tabelle 2: Alternative Einheiten.- Tabelle 3: Vorsätze für SI-Einheiten.- Tabelle 4: Physikalische Konstanten.- Sachwortverzeichnis.