We have exploited the technique of TA cloning of a gene responsible for antibiotic resistance i.e Kanamycin resistance by following the basic steps involved in the cloning process.Background of the invention An essential requirement for effective genetic engineering of bacteria and other cells propagated in cell cultures is the capacity to select the cells with a specific genotypic alteration. The most common selection strategy in recombinant DNA technology is to include a selection marker in the cloning vector or plasmid. A selection marker can be a cloned gene or a DNA sequence, which...

Nous avons exploité la technique de clonage TA d'un gène responsable de la résistance aux antibiotiques, à savoir la résistance à la kanamycine, en suivant les étapes de base du processus de clonage. Contexte de l'invention Une condition essentielle pour un génie génétique efficace des bactéries et autres cellules propagées dans des cultures cellulaires est la capacité de sélectionner les cellules présentant une altération génotypique spécifique. La stratégie de sélection la plus courante dans la technologie de l'ADN recombinant consiste à inclure un marqueur de...

Foot-and Mouth Disease virus (FMDV) is diagnosed by virus isolation test combined with antigen ELISA and recently one step RT-PCR. Use of fluorogenic RT-PCR is getting more and more importance for rapid detection of FMDV from clinical samples that cannot be processed by regular virus isolation tests and antigen ELISA. Quantitative real-time RT-PCR (qRT-PCR) combines Reverse Transcription with PCR amplification and detection of positive amplification using fluorescent probes like TaqMan ® probe. In the present study, a TaqMan® probe based qRT-PCR was standardized and used for detection of...

Das Virus der Maul- und Klauenseuche (MKS) wird durch einen Virusisolationstest in Kombination mit einem Antigen-ELISA und neuerdings mit einer einstufigen RT-PCR diagnostiziert. Die fluorogene RT-PCR gewinnt immer mehr an Bedeutung für den schnellen Nachweis des MKS-Virus aus klinischen Proben, die nicht mit den üblichen Virusisolationstests und Antigen-ELISA bearbeitet werden können. Bei der quantitativen Echtzeit-RT-PCR (qRT-PCR) wird die Reverse Transkription mit der PCR-Amplifikation und dem Nachweis einer positiven Amplifikation mit fluoreszierenden Sonden wie der TaqMan ®-Sonde...

Le virus de la fièvre aphteuse (FMDV) est diagnostiqué par un test d'isolement du virus combiné à un test ELISA de l'antigène et, depuis peu, par une RT-PCR en une seule étape. L'utilisation de la RT-PCR fluorogénique prend de plus en plus d'importance pour la détection rapide du virus de la fièvre aphteuse à partir d'échantillons cliniques qui ne peuvent pas être traités par des tests d'isolement du virus et des tests ELISA de l'antigène. La RT-PCR quantitative en temps réel (qRT-PCR) combine la transcription inverse avec l'amplification par PCR et la détection de...