Untersuchung zur Medienoptimierung und zur Kultivierungsmethodik durch Immobilisierung am Baculovirus Expressionssystem

ISBN-13: 9783838625881 / Niemiecki / Miękka / 2000 / 88 str.

Johannes Schulte-Pelkum

Opis

Inhaltsangabe: Gang der Untersuchung: Diese Arbeit wurde unter der Zielsetzung angefertigt, die Methodik der Immobilisierung fur das System SF21/ACMNPV zu optimieren und Mastabsubertragungen bis hin zu technischen Fermentationen mit vergroerten Arbeitsvolumina zu realisieren. Ein Teil der Arbeit befasste sich mit dem Bereich der Optimierung des Kultivierungsmediums, wobei von einer Medienformulierung ausgegangen wurde, die in ihrer handelsublichen Form schon ohne den Zusatzstoff Serum auskommt, und daher am ehesten zu einer Massenproduktion mit dem BEVS geeignet erscheint. Zu diesem Zweck wurden in der Literatur 1,8,15] gefundene Hinweise auf eventuell limitierende Medieninhaltsstoffe untersucht. In vergleichenden Untersuchungen wurde versucht, die Zellen- bzw. Virenausbeuten in einen Zusammenhang mit uberkonzentriert zugesetzten Medienkomponenten zu bringen. Desweiteren wurden Hungerexperimente mit verkapselten Insektenzellkulturen vorgenommen, um Informationen uber geeignete Futterungsintervalle in Abhangigkeit der Zelldichte zu bekommen. Diesem Versuch lag die sogenannte „Nutritional Depth" - Theorie 31 ], die fur Suspensionskulturen aufgestellt wurde, zugrunde. Wie die Ergebnisse zeigen, kann dies fur immobilisierte Kulturen nicht bestatigt werden. Im zweiten Teil dieser Arbeit wurde eine neuartige Technologie zur Immobilisierung von Zellen auf ihre Anwendbarkeit mit dem Natrium-Cellulosesulfat-Poly-DADMAC-System hin untersucht. Es handelte sich hierbei um ein Verkapselungsgerat der Firma Inotech, das im Gegensatz zu anderen vertropfenden Geraten auf dem dynamischen Prinzip resonanzinduzierter Zerlegung eines Strahls beruht, und somit hohere Durchflussraten und kurzere Verkapselungszeiten erwarten lie. Nach entsprechenden Modifikationen wurden mit diesem Gerat Kapselmengen erzeugt, die unter Anwendung der bisherigen Methode die 8-10fache Zeit in Anspruch genommen hatten. Die erzeugten Kapseln wurden in einem zu einem Standardruhrkessel umfunktionierten