Untersuchung Und Bestimmung Der Lipoide Im Blut

ISBN-13: 9783642885761 / Niemiecki / Miękka / 2012 / 408 str.

Nepomuk Zollner; Dietrich Eberhagen

Opis

IV Die Autoren der einzelnen Abschnitte werden in Fussnoten ge nannt. Die von ihnen verfassten Beitrage reichen jeweils, bis eine neue Autorennennung erfolgt. Entsprechendes gilt fur die Autoren angaben im Inhaltsverzeichnis. Im Interesse einer ubersichtlichen Gliederung war dieses etwas unorthodoxe Vorgehen notig. Einige ihrer starksten Impulse erhielt die Erforschung der Lipoide durch die Arbeiten unserer Lehrer SIEGFRIED J. THANN HAUSER und ERNST KLENK. Es ist uns eine Ehre, ihnen auch an dieser Stelle fur Anleitung und Vorbild zu danken. Munchen, Marz 1965 NEPOMUK ZOLLNER und DIETRICH EBERHAGEN Inhaltsverzeichnis I. Chemische Einfuhrung . . . . . . . . 1 1. Allgemeine Nomenklaturfragen (D. EBERHAGEN) 1 2. Fettsauren. . . . . . . . . . 2 3. Eigentliche Fette oder Glyceride 7 4. Glycerylather. . . . 9 5. Glycerinphosphatide. . . . 10 6. Sphingolipoide . . . . . . 16 7. Ganglioside (H. WIEGANDT). 19 8. Cholesterin und Cholesterinester (D. EBERHAGEN) 29 9. Gallensauren (B. FROSCH u. H. WAGENER) 31 10. Literaturverzeichnis . . . . . . . . . . . 33 11. Allgemeine Untersuchungsmethoden . 35 1. Extraktion der Lipoide aus dem Serum (N. ZOLLNER) 35 2. Gruppentrennungen der Lipoide (D. EBERHAGEN) . . 39 A. Praparative Verfahren. . . . . . . . . . . . . 41 a) Fraktionierung durch Acetonfallung der Phosphatide. 41 b) Fraktionierung durch Dialyse der Neutralfette . 42 c) Fraktionierung auf chromatographischem Wege 44 d) Chromatographische Auf trennung . . . 46 B. Analytische Verfahren. . . . . . . . . . . 51 a) Chemische Bestimmungen (D. EBERHAGEN) . . 51 b) Chromatographische Untersuchungen (G. WOLFRAM) 51 DunnBchichtchromatographische Trennung der Gesa- lipoide in die Lipoidhauptgruppen 56 3. Untersuchung der Phosphatide 57 A. Praparative Verfahren (H."

Spis treści

I. Chemische Einführung.- 1. Allgemeine Nomenklaturfragen (D. Eberhagen).- 2. Fettsäuren.- 3. Eigentliche Fette oder Glyceride.- 4. Glyceryläther.- 5. Glycerinphosphatide.- 6. Sphingolipoide.- 7. Ganglioside (H. Wiegandt).- 8. Cholesterin und Cholesterinester (D. Eberhagen).- 9. Gallensäuren (B. Frosch u. H. Wagener).- 10. Literaturverzeichnis.- II. Allgemeine Untersuchungsmethoden.- 1. Extraktion der Lipoide aus dem Serum (N. Zöllner).- 2. Gruppentrennungen der Lipoide (D. Eberhagen).- A. Präparative Verfahren.- a) Fraktionierung durch Acetonfällung der Phosphatide.- b) Fraktionierung durch Dialyse der Neutralfette.- c) Fraktionierung auf chromatographischem Wege.- d) Chromatographische Auftrennung.- B. Analytische Verfahren.- a) Chemische Bestimmungen (D. Eberhagen).- b) Chromatographische Untersuchungen (G. Wolfram).- Dünnschichtchromatographische Trennung der Gesamtlipoide in die Lipoidhauptgruppen.- 3. Untersuchung der Phosphatide.- A. Präparative Verfahren (H. Betzing).- a) Fraktionierung durch Ausfällung.- b) Säulenchromatographische Trennungen.- Auftrennung an einer Aluminiumoxydsäule.- Auftrennung an einer Kieselgelsäule.- c) Gegenstromverteilung.- B. Analytische Verfahren.- a) Chemische Bestimmungen.- Bestimmung des Phosphorgehaltes in Lipoiden (H. Betzing).- Bestimmung des Cholins in Lipoiden (H. Betzing).- Bestimmung von Colamin und Serin in Lipoiden (H. Betzing).- Bestimmung des Plasmals in Lipoiden (D. Eberhagen).- Bestimmung des Inosits in Lipoiden (P. Böhm u. G. Richarz).- Bestimmung der partiellen Hydrolyseprodukte der Phos phatide (H. Betzing).- b) Chromatographische Untersuchungen (H. Betzing).- Chromatographische Trennung auf Kieselgelpapier.- Quantitative Analyse auf Kieselgelpapier.- Qantitative Analyse auf kieselgelimprägniertem Glas faserpapier.- Chromatographische Trennung auf Formalinpapier.- Eindimensionale dünnschichtchromatographische Trennung.- Trennung komplexer Gemische durch zweidimensionale Dünnschichtchromatographie.- Quantitative Dünnschichtchromatographie der Plasma Phosphatide.- c) Spektroskopische Untersuchungen (H. Betzing).- 4. Untersuchung der Cerebroside (D. Eberhagen).- A. Präparative Darstellung.- B. Analytische Verfahren.- a) Chemische Bestimmungen (D. Eberhagen).- Bestimmung reduzierbarer Zucker in Lipoiden (P. Böhm).- b) Chromatographische Untersuchungen (D. Eberhagen).- 5. Untersuchung der Ganglioside (H. Wiegandt).- A. Präparative Verfahren.- a) Darstellung der Rohganglioside.- Arbeitsweise zur Aufarbeitung größerer Gewebemengen.- Arbeitsweise zur Aufarbeitung kleiner Gewebemengen.- b) Auftrennung der Ganglioside.- B. Analytische Verfahren.- a) Dünnschichtchromatographische Untersuchungen.- b) Chemische Bestimmungen.- Bestimmung der Neuraminsäure.- Bestimmung der Zuckerbausteine.- Untersuchung der Fettsäuren und des Sphingosins.- Charakterisierung der Ganghoside durch Partialhydrolyse.- Charakterisierung durch Ozon-Abbau.- Charakterisierung durch das Verhalten gegen Neuraminidase (RDE).- 6. Untersuchung der Cholesterinester und des Cholesterins (D. Ebebhagen).- A. Präparative Verfahren.- a) Gewinnung der Cholesterinester.- b)Chromatographische Auftrennung der Cholesterinester.- c)Abtrennung des freien Cholesterins als Digitonid.- B. Analytische Verfahren.- a)Chemische Bestimmungen (D. Ebebhagen).- b)Chromatographische Untersuchungen (G. Wolfeam).- Dünnschichtchromatographische Untersuchung der Cholesterinester mit quantitativer Auswertung der Chromatogramme.- Zweidimensionale Auftrennung der Cholesterinester.- 7. Untersuchung der Glyceride.- A. Präparative Verfahren (D. Ebebhagen).- a) Chromatographische Fraktionierung.- b) Chromatographische Auftrennungen.- c) Fraktionierung durch Gegenstromverteilung.- d) Fraktionierung durch Dialyse.- e) Fraktionierung durch Kristallisation.- B. Analytische Verfahren.- a) Chemische Bestimmungen (D. Ebebhagen).- Bestimmung des Glycerins.- Bestimmung des Monoglyceridgehaltes.- b) Chromatographische Untersuchungen (G. Wolfbam u. D. Ebebhagen).- Dünnschichtchromatographische Trennung auf hydro-phobiertem Kieselgel.- c) Spektroskopische Untersuchungen (D. Ebebhagen).- 8. Untersuchung der Fettsäuren (D. Ebebhagen).- A. Präparative Verfahren.- a) Gewinnung der Fettsäuren.- Umesterung mit methanolischer Schwefelsäure.- Alkalische Umesterung.- Verseifung der Lipoide.- Umesterung der Cholesterinester.- Gewinnung der freien Fettsäuren aus einem Lipoidgemisch.- Veresterung der Fettsäuren mit methanolischer Salzsäure.- Veresterung der Fettsäuren mit methanolischer Bortrifluoridlösung.- Veresterung der Fettsäuren mit Diazomethan.- b) Gruppentrennungen der Fettsäuren.- Fraktionierung durch Tiefkühlkristallisation.- Fraktionierung über die Bromkörper.- Fraktionierung als Quecksilber(II)-Addukte.- Entfernung der ungesättigten Bestandteile durch Permanganatoxydation.- Abtrennung der Hydroxyfettsäuren.- c) Trennung durch Destillation.- d) Gegenstromverteilung.- e) Säulenchromatographische Trennungen.- B. Analytische Verfahren.- a) Chemische Bestimmungen.- Bestimmung des Äquivalentgewichtes.- Bestimmung der Jodzahl.- b) Chromatographische Untersuchungen.- Papierchromatographische Untersuchung der Fettsäuren.- Dünnschichtchromatographische Untersuchung der Fettsäuren.- Dünnschichtchromatographische Trennung der Fett säuremethylester nach dem Grad der Ungesättigtheit.- Gaschromatographische Untersuchung.- c) Spektroskopische Untersuchungen.- Bestimmung der Polyenfettsäuren aus dem Ultraviolett spektrum.- Untersuchung im Infrarotspektrum.- 9. Untersuchung der Gallensäuren (B. Frosch u. H. Wagener).- A. Präparative Verfahren.- a) Gewinnung als freie Gallensäuren.- b) Säulenchromatographische Trennung.- Umkehrphasenchromatographie zur Trennung freier und konjugierter Gallensäuren.- Umkehrphasenchromatographie zur Trennung der freien Gallensäuren.- Verteilungschromatographie zur Trennung der freien Gallensäuren.- B. Analytische Verfahren.- a) Chemische Bestimmung.- Quantitative Bestimmung nach Gänshirt u. Mitarb.- b) Chromatographische Untersuchungen.- Papierchromatographische Trennung.- Dünnschichtchromatographische Trennung.- Gaschromatographische Trennung.- c) Spektroskopische Untersuchung.- 10. Bestimmung der Radioaktivität in markierten Lipoiden (G. Kremer).- a) Allgemeine Bemerkungen zur Radioaktivitätsmessung.- b) Radioaktivitätsmessung mit Zählrohren.- Zählverfahren.- Korrektur der Selbstabsorption.- Herstellung der Zählproben.- c) Radioaktivitätsmessung mit flüssigen Szintillatoren.- Zählverfahren.- Bestimmung von Löscheffekten.- Gleichzeitige Bestimmung von 3H und 14C.- Herstellung der Zählproben.- d) Radiochromatographie.- Bestimmung der Radioaktivität auf Papier- und Dünnschichtchromatogrammen.- Bestimmung der Radioaktivität in gaschromatographisch getrennten Lipoidbestandteilen.- 11. Literaturverzeichnis.- III. Spezielle blutchemische Untersuchungsmethoden.- 1. Bestimmung der Gesamtlipoide (K. Kirsch).- a) Gravimetrische Bestimmung.- b) Kolorimetrische Bestimmung mit der Sulfophosphovanillin-Reaktion.- 2. Bestimmung des Lipoidphosphors (N. Zöllner).- 3. Piasmalbestimmung (D. Eberhagen).- 4. Bestimmung des lipoidgebundenen Cholins (H. Wagener).- a) Bestimmung nach Wheeldon u. Collins.- b) Bestimmung nach Böttcher u. Mitarb.- c) Bestimmung nach Levine u. Chargaff.- 5. Bestimmung des lipoidgebundenen Serins und Colamins (H. Wagener).- a) Bestimmung nach Long u. Staples.- b) Bestimmung nach Collins u. Wheeldon.- c) Bestimmung nach papierchromatographischer Trennung.- 6. Bestimmung des Sphingosins (H. Wagener).- a) Bestimmung nach McKibbin u. Taylor.- b) Bestimmung nach Wittenberg.- c) Bestimmung nach Sakagami.- d)Bestimmung nach Lauter u. Trams.- e) Dünnschichtchromatographische Trennung der Sphing lipoidbasen.- f) Gaschromatographische Trennung der Sphingolipoidbasen..- 7. Bestimmung der Lipoidzucker (P. Böhm).- a) Hexosaminbestimmung nach Blix.- b) Neuraminsäurebestimmung nach Böhm.- 8. Bestimmung des Cholesterins (N. Zöllner).- a) Herstellung des Aceton-Alkohol-Extraktes.- b) Bestimmung des Cholesterins in der klinischen Routine.- c) Bestimmung des freien Cholesterins.- d) Bestimmung des Gesamtcholesterins nach Verseifung der Lipoide.- 9. Bestimmung der Neutialfette (M. Eggstein).- a) Neutralfettberechnung aus Gesamtfett und Lipoidwerten.- Gravimetrische Gesamtfettbestimmung und Neutralfett berechnung.- Oxydocolorimetrische Gesamtfettbestimmung und Neu tralfettberechnung.- b) Neutralfettberechnung aus Gesamtfettsäuren und Lipoidfett säurewerten.- c) Neutralfettberechnung aus Esterfettsäuren und Lipoidfett säuren.- Vereinfachtes (rechnerisches) Verfahren.- Erweitertes (analytisches) Verfahren.- d) Neutralfettberechnung über Glycerin.- Chemische Glycerinbestimmung und Neutralfettberech nung.- Enzymatische Glycerinbestimmung und Neutralfettbe rechnung.- 10. Bestimmung des lipoidgebundenen Glycerins (N. Zöllner).- a) Trennung der neutralen Lipoide von den Phosphatiden.- b) Verseifung der Fraktionen.- c) Bestimmung des Glycerins mittels Perjodatoxydation.- d) Enzymatische Bestimmung des Glycerins.- Spaltung von Glycerophosphat mittels saurer Phosphatase.- Bestimmung des Glycerins.- 11. Bestimmung der Gesamtfettsäuren (M. Eggstein).- 12. Bestimmung der Acylesterverbindungen (M. Eggstein).- 13. Bestimmung der freien Fettsäuren (E. BÖhle).- a) Bestimmung nach Gordon u. Mitarb.- b) Bestimmung nach Dole.- c) Kolorimetrische Bestimmung nach Coleman u. Middlebrook.- 14. Spektroskopische Bestimmung der mehrfach ungesättigten Fettsäuren (D. Eberhagen).- 15. Bestimmung der Carotinoide (D. H. Blankenhorn).- 16. Bestimmung von Vitamin A (J. Tiews).- a) Makromethoden.- b) Mikromethoden.- Verfahren nach Bessey u. Mitarb.- Neeld-Pearson-Verfahren.- Farbreaktion mit FeCl3-Acetylchlorid.- Mikroverfahren nach der Carr-Price-Tüpfelmethode.- c) Chromatographische Auftrennung von Vitamin A-Carotinoiden im Blutplasma.- 17. Bestimmung der Gallensäuren (B. Frosch u. H. Wagener).- a) Bestimmung nach Stiernspetz.- b) Bestimmung nach Carey.- 18. Bestimmung des Klärfaktors und der Lipoproteidlipase (S. Sailer, F. Sandhofer u. H. Braunsteiner).- a) Bestimmung des Klärfaktors.- b) Bestimmung der Lipoproteidlipase.- 19. Literaturverzeichnis.- IV. Anhang.- 1. Normalwerte der Plasmalipoide (N. Zöllner).- 2. Trocknen und Reinigen der Lösungsmittel (G. Wolfram u. J. Tiews).- 3. Feuersicherheitliche und gewerbeaufsichtliche Mindesterfordernisse für Laboratorien und Lösungsmittel-Lagerräume (G. Wolfram).- 4. Zur Einrichtung eines Lipoidlaboratoriums (N. Zöllner, D. Eberhagen u. G. Wolfram).

O autorze

Prof. Dr. med Nepomuk Zöllner, Facharzt für Innere Medizin, war von 1973 bis 1993 Vorstand der Medizinischen Poliklinik der Universität München. Das Hauptaugenmerk seiner klinischen und wissenschaftlichen Tätigkeit richtete er, auch als gelernter Biochemiker, auf ernährungsbedingte Krankheiten und auf Störungen des Stoffwechsels, speziell die Arteriosklerose, auf Verdauungsstörungen und Gelenkerkrankungen. Mit der Gicht hat er sich als Forscher wie als Arzt jahrelang - bis heute - intensiv beschäftigt. Professor Zöllner war Präsident der Deutschen Gesellschaften für Innere Medizin, für Verdauungs- und Stoffwechselkrankheiten und für Ernährung. Er ist Gründer und Ehrenpräsident der Europäischen Gesellschaft für die Erforschung des Purin(Harnsäure-)-Stoffwechsels.