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Propiedades Opticas de Un Sistema de Epifluorescencia
ISBN-13: 9783659013829 / Hiszpański / Miękka / 2012 / 80 str.
En el presente trabajo se determinaron las propiedades opticas de un microscopio de epifluorescencia a traves del calculo de su funcion de transferencia (PSF). La determinacion se realizo en forma empirica utilizando microesferas fluorescentes patron con un diametro menor al poder de resolucion de las lentes. Se observo que el sistema produce alteraciones, ya que las imagenes de las microesferas luego de atravesar las opticas, exhiben una elongacion axial. Dicho fenomeno fue evaluado en diferentes arreglos opticos tridimensionales. Los cambios en la resolucion axial encontrados fueron analizados por medio de la determinacion del parametro: ancho total a la mitad del maximo (FWHM) y geometricamente a traves de la representacion tridimensional de la senal fluorescente dispersada. Se encontro que el arreglo tridimensional provoca una aberracion esferica, y se dedujo que las lentes estan corregidas para trabajar solo con especimenes delgados (arreglos bidimensionales). Para poder trabajar en microscopia 3D, se recurrio al proceso de desconvolucion, utilizando la PSF como estimador de las imperfecciones del sistema."
En el presente trabajo se determinaron las propiedades ópticas de un microscopio de epifluorescencia a través del cálculo de su función de transferencia (PSF). La determinación se realizó en forma empírica utilizando microesferas fluorescentes patrón con un diámetro menor al poder de resolución de las lentes. Se observó que el sistema produce alteraciones, ya que las imágenes de las microesferas luego de atravesar las ópticas, exhiben una elongación axial. Dicho fenómeno fue evaluado en diferentes arreglos ópticos tridimensionales. Los cambios en la resolución axial encontrados fueron analizados por medio de la determinación del parámetro: ancho total a la mitad del máximo (FWHM) y geométricamente a través de la representación tridimensional de la señal fluorescente dispersada. Se encontró que el arreglo tridimensional provoca una aberración esférica, y se dedujo que las lentes están corregidas para trabajar sólo con especímenes delgados (arreglos bidimensionales). Para poder trabajar en microscopía 3D, se recurrió al proceso de desconvolución, utilizando la PSF como estimador de las imperfecciones del sistema.
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