La Recombinaison Homologue � l''�chelle de la Mol�cule Unique » książka
La Recombinaison Homologue � l''�chelle de la Mol�cule Unique
ISBN-13: 9786131516306 / Francuski / Miękka / 2018 / 164 str.
Dans cette thA]se, nous avons A(c)tudiA(c) les aspects mA(c)canique et thermodynamique de la recombinaison homologue, un processus crucial de rA(c)paration de l''ADN. Des travaux prA(c)liminaires d''observation de molA(c)cules d''ADN A(c)tirA(c)es lors de la recombinaison homologue ont mis A jour la complexitA(c) de ce processus et la difficultA(c) de l''observer en fluorescence. Nous avons ensuite dA(c)veloppA(c) une nouvelle technique appelA(c)e pinces magnA(c)tiques sensibles au couple nous permettant de maintenir une molA(c)cule unique d''ADN avec une force et un couple connus tout en mesurant son A(c)tat de torsion avec une rA(c)solution de quelques degrA(c)s. Nous avons ainsi montrA(c) de maniA]re directe que la polymA(c)risation de la recombinase hRad51 a lieu par ajout de monomA]res chacun dA(c)roulant l''ADN de 65A en moyenne. Nous avons A(c)galement A(c)tA(c) capables de mesurer le couple d''arrAat de la polymA(c)risation. Une modA(c)lisation mA(c)cano-chimique nous a finalement permis d''A(c)valuer le potentiel chimique de la polymA(c)risation, en bon accord avec les donnA(c)es biochimiques existantes.
Dans cette thèse, nous avons étudié les aspects mécanique et thermodynamique de la recombinaison homologue, un processus crucial de réparation de lADN. Des travaux préliminaires dobservation de molécules dADN étirées lors de la recombinaison homologue ont mis à jour la complexité de ce processus et la difficulté de lobserver en fluorescence. Nous avons ensuite développé une nouvelle technique appelée "pinces magnétiques sensibles au couple" nous permettant de maintenir une molécule unique dADN avec une force et un couple connus tout en mesurant son état de torsion avec une résolution de quelques degrés. Nous avons ainsi montré de manière directe que la polymérisation de la recombinase hRad51 a lieu par ajout de monomères chacun déroulant lADN de 65° en moyenne. Nous avons également été capables de mesurer le couple darrêt de la polymérisation. Une modélisation mécano-chimique nous a finalement permis dévaluer le potentiel chimique de la polymérisation, en bon accord avec les données biochimiques existantes.
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