Bakterien-, Phagen- Und Molekulargenetik

ISBN-13: 9783540059882 / Niemiecki / Mikrofilm / 1990 / 285 str.

U. Winkler; W. Ruger; W. Wackernagel

Spis treści

I. Allgemeines.- a. Abkürzungen und häufig benutzte Begriff.- b. Experimentelle Grundausrüstung.- c. Titer-Berechnung und einige statistische Verfahren; statistische Tafeln.- d. Fachliteratur.- II. Versuchsanleitungen und Übungsaufgaben.- a. Phagenanreicherung und Ultrazentrifugation.- 1. Vermehrung des Phagen T4.- 2. Anreicherung und Reinigung des Phagen T4 A. Dextransulfat-PEG-Zweiphasentechnik.- 3. Anreicherung und Reinigung des Phagen T4 B. Zentrifugation ohne und mit CsCl-Lösung als Unterlage.- 4. Bestimmung der Dichte von ?-Phagen durch CsCl-Gradientenzentrifugation.- 5. Abschätzen von Sedimentationskonstanten durch Saccharosegradienten-Zentrifugation.- Übungsaufgaben.- b. Nukleinsäuren und Transcription.- 6. Isolation von DNS aus T4 oder T5 Phagen.- 7. Thermische De- und Renaturierung von DNS verschiedener Organismen.- 8. Isolation 3H-Uridin-markierter mRNS aus T4-infizierten Bakterien.- 9. Hybridisation von Phagen-DNS und -mRNS auf Nitrozellulosefiltern.- 10. Zeitpunkt der Transcription eines Genes, ermittelt durch Phänokopie mit 5-Fluoruracil.- Übungsaufgabe.- c. Mutation und Photobiologie.- 11. Unterscheidung von Geno- und Phänotyp.- 12. Nachweis der Zufallsverteilung von Spontanmutationen.- 13. Mutagene und inaktivierende Wirkung von Ultraviolett auf den Phagen Kappa.- 14. Reversible photochemische Änderung der Cytidylsäure.- 15. Chemische Induktion von Hin- und Rückmutationen bei Bakterien.- Übungsaufgaben.- d. Übertragung und Rekombination von genetischem Material.- 16. Kreuzung von E. coli Bakterien nach der „Fahrplan-Technik“.- 17. Zwei- und Dreifaktorkreuzungen mit dem Phagen Kappa.- 18. Transduktion gekoppelter und ungekoppelter Gen-Marken mit dem Phagen P1.- 19. Übertragung und Eliminierung eines Plasmids (F’ lac).- 20. Induktion lysogener und bakteriocinogener Bakterien.- 21. Transfektion von E. coli Sphaeroplasten mit DNS des Phagen ?.- Übungsaufgaben.- e. Phänische Expression.- 22. Bestimmung eines metabolischen Blocks durch Auxanographie und Syntrophie.- 23. Komplementation von Nonsense-Mutanten des Phagen Kappa.- 24. Konstitutive und induzierte Synthese von ß-Galactosidase.- 25. Die Morphopoiese von T4 Phagen.- Übungsaufgaben.- III. Anhang.- a. Nährmedien und Lösungen.- b. Bakterien- und Phagenstämme.- c. Bezugsquellen für experimentelles Zubehör.- d. Das Protokollieren wissenschaftlicher Versuche.- IV. Versuchsergebnisse und Lösungen zu den Übungsaufgaben.- a. Versuchsergebnisse.- b. Lösungen zu den Übungsaufgaben.